丁进国 丁小祥 李荣杰  上海光明荷斯坦牧业有限公司

近年来，奶牛养殖业快速发展，养殖户为了扩群与扩繁需求，性控冻精越来越得到业内人士的青睐，使用数量在不断攀升，目前估计约有90%左右的牧场或养殖户都在普遍使用。但在实际使用过程中，使用的效果差距很大。情期受胎率好的用户可达50%~60%的；差的情期受胎率可能只有20%~30%。如何更好地把奶牛性控冻精使用好，我们必须对性控冻精的一些特点作一个全面了解。更好地掌握与运用性控冻精规律，在生产实际运用中使性控冻精的效果发挥更好、更理想。

性控冻精概念

将奶牛精液经过特殊处理，使含X、Y染色体的精子得到有效分离，将分离后得到的X精子进行分装冷冻，制成冻精细管，进行奶牛的人工授精。从而使母牛怀孕产母犊的技术，产母犊率可以达到90%以上。

性控冻精制作方法

上世纪八、九十年代性控冻精已有在制作，制作方法主要采用物理分离法。如：沉降法、离心法、电泳法、过滤法。主要利用X、Y精子不同物理性差异，如密度、大小、活力、形态、表面电荷的特点来进行物理分离。但制作后的效果与效率都较差，缺乏可靠性和重复性。因此，这些方法现已基本不再使用。

目前市场上广泛运用的性控冻精，都是采用美国的技术和设备，流失细胞仪分离制作而成。制作原理：流式细胞仪分离法是根据X、Y精子的DNA含量不同，X染色体的DNA要比Y染色体DNA多3.8%。在分离精子时，先将精子染色，当精子通过流式细胞仪时，即可根据荧光强度的差别，将X、Y精子分离而成。

性控冻精与常规冻精各项指标比较

性控冻精特点

活力高

性控冻精解冻后活力要比常规冻精活力高的主要原因是：在制作分离过程中，除了保留X精子、筛除Y精子外，还将原精液中质量差的死精和畸形精子筛除掉。

密度低

制作分离后的性控冻精精子的密度远低于常规冻精，约占常规冻精的1/5左右。

存活时间短

性控冻精在制作过程中会损到伤精子细胞膜，导致精子活力下降较快，降低了精子的稳定性，缩短了精子的寿命。性控冻精的存活时间相对于常规冷冻精液要短。因此，在使用性控冷冻精液进行人工授精时，对于技术的要求会更高。

价格贵

采用了高科技的精液分离技术，生产成本费用增加，性控冻精一般比常规冻精贵5倍左右。

性控冻精使用注意事项

◆性控冻精不建议与常规冻精同时解冻；

◆南方夏季热应激时不宜使用；

◆配种2次以上，不宜使用；

◆注射疫苗前后15天左右不宜使用；

◆繁殖障碍使用激素牛不宜使用；

◆不急于扩群，经产牛不建议使用。

性控冻精规范使用

性控冻精贮存

◆液氮罐应避免碰撞而使保温效果下降,应放置在人工授精专用操作室，保持清洁、干燥、通风。应防控非繁殖人员接触,周围不能有挥发性的化学品；

◆罐内应保持有足够量的液氮存量，液氮水平面保持在18cm以上，至16cm时即应添 加液氮；

◆取冻精时，提筒不得提出罐口，最少保持在罐口下5-6cm处，每次取用不准超过10秒钟。否则，应将提桶放回液氮罐15秒后再提起；

◆有条件牧场,每同一批号精液在使用前,均应抽样镜检活力，并做好记录。

性控冻精解冻

◆水浴锅,温度计应经常校正、应定期更换水、保持水浴锅内清洁；

◆冻精解冻温度为摄氏35°C,解冻时间40秒,解冻后，用干净毛巾或纸巾擦干冻精细管上的水珠；（有条件情况下，可现场解冻）

◆解冻后，冻精必须在最快时间内输精完毕，时间不超过15分钟。若输精头次较多,应分批解冻；

◆剪细管封口的剪刀刃口应保持洁净和锋利，并定期消毒；

◆冻精解冻后应装入输精套管，套管应放置无菌卫生器具内；

◆冻精解冻时应避免光线直射，避免与酒精等消毒药品接触，避免途中震荡。

母牛的选择

◆品种选择：选择中高产奶牛及其后代作为使用对象；

◆年龄选择：后备牛初配牛月龄达到14-16月龄；

◆营养与健康:体况正常、膘情适中生殖道无异常、发情周期正常；

◆体重与体高要求：体重≧375kg、体高≧127cm。

发情鉴定

   掌握母牛发情过程与内部生殖器官的变化，目的是确定母牛发情时间段，真正做到适时配种，获得最佳受胎率。

母牛性成熟后，每经过一个性周期都会有一次发情，称为发情周期。一般成母牛为18-24天，平均21天，青年母牛平均为20天。发情阶段可分为四个阶段，发情前期；发情盛期；发情后期；间情期。

◆发情前期特点

爬跨：爬跨它牛；不接受它牛爬跨；

阴户：潮红、略微肿胀；

粘液：少而稀薄，粘性差；

持续时间：6~10小时。

◆发情盛期特点

爬跨：静立接受爬跨；爬跨它牛；

阴户：红润、肿胀、外阴湿润闪光；

粘液：量多透明含有气泡，强拉丝性，拉丝呈Y状，两指牵拉可6-8次不断；

持续时间10~12小时。

◆发情后期特点

爬跨：拒绝它牛爬跨；爬跨它牛；

阴户：谈红、肿胀消失；

粘液：少而粘稠呈胶状；

持续时间：6~8小时。

◆间情期特点

间情期是母牛发情周期中最长的时间。母牛排卵后发情结束，到下一次发情开始的时间。

适时配种

精子和卵子的受精部位，在输卵管上1/3壶腹部。因此，只有适时配种才能提高受胎率。适时配种，首先要掌握母牛排卵时间。母牛发情持续时间一般为18~24小时，开始排卵在发情结束后6~8小时。精子在输卵管内有4~6小时的获能时间，卵子在6小时之内具有保持受精能力。根据性控冻精特点:活力高、密度低、存活时间短。所以我们在使用时，必须掌握这些要点，然后做到适时配种。

◆配种时间：根据性控冻精特点，输精时间应比常规冻精输精时间退迟3~4个小时；

◆外部观察：发情后期，母牛表现安静，外阴肿胀消失，阴户流出半透明牵缕性粘液；

◆直肠检查：卵泡不在增大，卵泡壁变薄，泡液呈波动性，紧张度增加，有一触即破的感觉，子宫兴奋性明显降低，已感觉不到发情旺期时子宫受到刺激后的充实感和弹性感。

输精技术

性控冻精有效精子数远低于常规冻精，价格高于常规冻精。如何提高受胎率，节省成本。在运用性控冻精输精时，不仅要严格掌握好输精时间，而且要有过硬的输精技术，才能达到理想的受胎率。有很多资料表明：性控冻精输精部位不同，受胎率也不同，而且存在明显差异。采用子宫角深部输精比子宫体输精受胎率高出很多，收到良好效果。同时，也对我们人工授精员，提出了高标准，严要求。在输精时要求做到：慢插、轻拉、缓出、输精完毕,套管口不应有血迹。

◆输精前用纸巾将阴户擦干净,严禁用消毒水清洗阴户；

◆进枪时，以35°C~40°C角向上插入5~10厘米，避开尿道口后，再改为略向前下方进入阴道；

◆直肠把握子宫颈；

◆内外两手协调操作；

◆不应以外面手强硬操作；

◆轻柔使输精枪通过子宫颈，滑向子宫体内至子宫体前沿，达卵泡侧子宫角深部大弯处；

◆输精枪到达输精部位后缓慢注入精液；

◆输精完毕，缓慢退出输精枪，按摩子宫直至外阴有强烈收缩最佳；

◆如需促排可在输精后，即肌注LRH-A3 25~50徽克。

结语

性控冻精尽量让繁殖经验较丰富的配种员使用；建议用于营养状况良好、发情周期正常的前两次青年母牛配种；加强牛只发情观察和准确的发情鉴定；尽量在牛只发情的后期进行配种；从解冻至输精结束不要超过15分钟；性控冻精不建议广泛采用同步排卵方案，但对于同步排卵处理后发情明显的个别母牛可以使用；性控冻精不建议用于胚胎移植的受体母牛；输精最佳部位：卵泡侧子宫角深部大弯处。

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